Магазин Toy&Toy — Super Toys

этапы и достоинства цитологического метода в онкологии и гинекологии

Что такое цитологическое исследование

Цитологическое исследование — одно из самых востребованных в онкологии. С его помощью врач оценивает состояние клеточных элементов и делает заключение о  злокачественной или доброкачественной природе новообразования. Изучаются особенности строения клеток, клеточный состав органов, тканей, жидкостей организма человека. Цитологическое исследование применяется при диагностике предраковых заболеваний и злокачественных новообразований различных органов: шейки и тела матки, молочной железы, щитовидной железы, легких, кожи, мягких тканей и костей, желудочно-кишечного тракта, лимфатических узлов и др. Для цитологического исследования берут мазки свода влагалища и шейки матки, мокроту, мочу, экссудаты из полостей и т.д.

Когда назначается цитологическое исследование?

В большинстве случаев врачи – терапевты, гинекологи, онкологи и другие специалисты — прибегают к цитологической диагностике при подозрении на опухолевое заболевание.

Цитологический метод применяется для исследования новообразований в различных органах – кожа, молочная железа, лёгкие, средостение, печень, почки, забрюшинные образования, щитовидная железа, предстательная железа, яичко, яичники, лимфатические узлы, миндалины, слюнные железы, мягкие ткани, кости и др.

Наибольшее распространение цитологические исследования получили в области гинекологии. Это доступный и быстрый метод скрининга, доказавший свою эффективность в диагностике предраковых заболеваний и раннего рака шейка матки.

Нередки случаи, когда цитологическое исследование помогало обнаружить рак желудка, легкого, мочевого пузыря и др. на самых ранних стадиях, когда рентгенологические и эндоскопические исследования не выявили изменений.

В период лечения опухолевого заболевания необходимо постоянно контролировать эффективность проводимой терапии. Для этого необходимы быстрые и эффективные методы диагностики. Цитологическое исследование в этих случаях позволяет оперативно получить ответы на большинство возникающих у врачей вопросов по поводу течения болезни. Цитологическое исследование широко используется также и после окончания специализированного (хирургического, химиотерапевтического или лучевого) лечения для контроля течения заболевания и раннего выявления возможного рецидива или прогрессирования опухоли (исследование лимфатических узлов, плеврального экссудата и т.д.).

Основные области применения цитологических исследований в онкологии:

• Скрининг, профилактические осмотры
• Диагностика – установление и уточнение диагноза
• Контроль результатов во время и после проведения терапии

В чем отличие цитологии от гистологического исследования?

Отличие цитологического исследования от гистологического, в первую очередь, заключается в том, что изучаются именно клетки, а не срезы тканей. Для гистологического исследования требуется либо операционный материал, либо забор материала методом трепан-биопсии. Для цитологического же исследования достаточно мазка со слизистой оболочки, соскоба с поверхности опухоли или материала, полученного тонкой иглой.

Подготовка гистологического препарата требует больше усилий и времени, нежели подготовка для цитологического анализа.

Как выполняется цитологическое исследование?

Для анализа используют различный биоматериал.

Эксфолиативный материал, то есть полученный методом «слущивания»:

• соскобы с поверхности эрозий, ран, язв;
• соскобы с шейки матки и цервикального канала, аспираты из полости матки;
• секреты желез, экскреты, мокрота, транссудаты, экссудаты, промывные воды и т.д.
• Исследование мочи на атипические клетки

Пункционный материал:

• пунктаты, полученные тонкой иглой (тонкоигольная биопсия)
• отпечатки материала трепан-биопсий  из опухолей и различных новообразований

Операционный материал:

• мазки-отпечатки и соскобы с удаленной ткани, жидкость, смывы и др. материал, полученный при проведении хирургических вмешательств.

Эндоскопический материал:

• материал, полученный при проведении эндоскопического исследования

Цитологическое исследование — наиболее щадящий метод диагностики. Обычно забор материала для анализа протекает безболезненно, в амбулаторных условиях, без травматического воздействия на органы и ткани.

Взятый для анализа клеточный материал в цитологической лаборатории переносят на предметные стекла, окрашивают и исследуют под микроскопом.

Цитоморфолог использует в своей работе совокупность признаков атипии клетки, критически оценивая их наличие и степень выраженности. Результат анализа напрямую зависит от профессионализма специалиста, проводящего исследование: как в части подготовки материала, так и в части его исследования под микроскопом.

На поверхности опухолевых клеток есть особые белки – антигены. Причем, каждая опухоль экспрессирует свой собственный набор антигенов. При необходимости с помощью специальных реактивов для иммуноцитохимического исследования врач-цитолог может не только установить наличие злокачественно трансформированных клеток в исследуемом образце, но и определить гистотип опухоли, ее органную принадлежность, факторы прогноза и чувствительность к лечению.

Цитологический метод в диагностике опухолей и опухолеподобных процессов

Цитопатология, клиническая или диагностическая цитология, изучает клеточный состав патологических процессов. В качестве отдельной медицинской специальности официально признана в 1941 г. после работ Папаниколау Г. и Траута Н. К чести нашей страны разработка цитологического метода диагностики начата в 1938 г. в клинико-диагностической лаборатории Московского научно-исследовательского онкологического института им. П.А. Герцена. В 1941 г. профессор Н.Н. Шиллер-Волкова на сессии института доложила о первых результатах по исследованию выделений из влагалища, мокроты и пунктатов. В развитии цитологии можно выделить три основных этапа: эксфолиативная, в основном гинекологическая цитопатология; аспирационная цитология, бурный расцвет которой начинается с 80-х годов и связан с внедрением ультразвуковой диагностики, и современный этап развития определяется применением иммуноцитохимических и молекулярных методов исследования, а также автоматизированного скрининга в гинекологической цитологии.

Цитологический метод технически прост, быстр, сравнительно дешев, малотравматичен. Однако «легкость» цитологического метода обманчива, так как цитологическое исследование должно заканчиваться формулировкой заключения, основываясь на котором разрабатывается тактика лечения.

По способу получения материала цитологию можно подразделить на дооперационную (эксфолиативную, абразивную, аспирационную) и интраоперационную. Эксфолиативная цитология включает в себя исследование вагинальных мазков, мокроты, мочи, плевральной, перитонеальной, перикардиальной, цереброспинальной, синовиальной жидкости и т.д. Этот раздел цитологии отличается простотой техники получения большого количества различного типа клеток, в том числе воспалительного ряда. Клеточный материал может быть не очень хорошо сохранен. Для получения информативного материала с поверхности патологического очага удаляют гноевидные массы, корочки, некротический налет. Если полученный материал представляет жидкость, то в нее добавляется цитрат натрия, чтобы жидкость не свернулась.

Абразивная цитология получает материал из определенного участка внутренних органов, в том числе исследуются субэпителиальные поражения с помощью фиброоптических инструментов. При таком взятии материала клетки хорошо сохраняются, и препараты легко интерпретировать. Материал получают из шейки матки, вагины, эндометрия, респираторного, желудочно-кишечного, мочеполового тракта.

Тонкоигольная биопсия в настоящее время позволяет получить материал практически из любого органа. Метод постоянно совершенствуется и дает оптимальные результаты, что делает его в плане диагностики высокоэффективным и экономичным.

Взятый для цитологического исследования материал помещают на край предметного стекла и другим предметным или покровным стеклом равномерно, сильно не надавливая, тонким слоем распределяют по всей поверхности препарата.

В последние годы помимо рутинных цитологических мазков для получения качественных монослойных цитологических препаратов используется жидкостная система: пунктаты вносятся в специальную среду накопления, после чего центрифугируются в режиме 1000 оборотов в течение 5 минут при среднем ускорении на центрифуге (Суtospin-3, Суtospin-4). Применение методики жидкостной цитологии имеет ряд преимуществ: обеспечивает сохранность клеточных структур, уменьшает фон, клетки сосредотачиваются в одном месте – «окошке», что сокращает время просмотра препарата и значительно экономит дорогие сыворотки при проведении иммуноцитохимического исследова-

ния. Для создания архива и возможности последующего исследования материала используется методика Cell-block, при которой получаются препараты, занимающие промежуточное положение между цитологическими и гистологическими.

Влажная фиксация препарата в спирте сразу после взятия мазков применяется при окраске по Папаниколау. В остальных случаях мазки высушивают на воздухе, а затем фиксируют уже в лаборатории. Наиболее распространенный способ фиксации – в равных объемах спирта и эфира (смесь Никифорова). Для иммуноцитохимического исследования применяют фиксацию ацетоном. При окраске мазков используют панхромную окраску азур-эозином по методу Романовского – Гимза в различных модификациях (Лейшмана, Паппенгейма), а также окраска гематоксилином и эозином, особенно при исследовании гинекологического материала используется окраска по Папаниколау. Возможно при рутинном исследовании или специальной окраске выявление бактериальной флоры, в том числе бацилл Коха, лепры, хеликобактера, трихомонад и т.д.

Цитологическая диагностика основана на следующих принципах:

• Разница клеточного состава в норме и патологии.
• Оценка не одной отдельно взятой клетки, а совокупности клеток, большое значение придается фону препарата.
• Цитолог должен иметь патологоанатомический базис.
• Каждое исследование завершается формулировкой заключения.

Критерии цитологической диагностики злокачественных новообразований составляются из оценки клетки, ядра и ядрышка.

Клетка:

– увеличена в размере, иногда гигантская, редко размер близок к норме, что затрудняет цитологическую диагностику, например, при коллоидном, тубулярном раке, маститоподобном варианте долькового рака молочной железы, фолликулярном раке щитовидной железы, карциноиде, почечноклеточном светлоклеточном раке, высокодифференцированных веретеноклеточных саркомах;

– изменение формы и полиморфизм клеточных элементов;

– нарушение соотношения ядра и цитоплазмы в сторону увеличения доли ядра;

– диссоциация степени зрелости ядра и цитоплазмы, например, молодое ядро в ороговевшей цитоплазме при высокодифференцированном плоскоклеточном раке.

Ядро:

– увеличение размера, полиморфизм, бугристость, неравномерный рисунок хроматина, наиболее постоянный признак – неровность контуров, гиперхромия, фигуры клеточного деления в цитологических препаратах сравнительно редки.

Ядрышко:

– число ядрышек больше, чем в нормальной клетке, ядрышки увеличены в размере, неправильной формы.

Несмотря на присутствие критериев злокачественности у подавляющего большинства клеток, в некоторых клетках рака эти критерии могут отсутствовать или быть выражены в неполном объеме. Необходимо обращать внимание на особенности взаимного расположения клеток, характер межклеточных связей. Заключение формулируют по совокупности признаков при достаточном количестве клеточного материала. Попытка оценить мазок по неадекватно взятому материалу – наиболее частая причина ошибочных заключений.

Основные задачи цитологической диагностики состоят в следующем:

1. Формулировка заключения до лечения.
2. Интраоперационная срочная диагностика.
3. Контроль эффективности лечения.
4. Оценка важнейших факторов прогноза течения заболевания.

Цитологическое заключение до лечения включает:

• определение гистогенеза новообразований;
• установление степени дифференцировки опухолевого процесса;
• уточнение степени распространенности опухоли;
• изучение фоновых изменений;
• определение некоторых факторов прогноза;
• возможность исследования бактериальной флоры.

Современное цитологическое заключение не только констатирует наличие рака, но и указывает гистологический тип опухоли и степень дифференцировки согласно общепринятым международным классификациям (МКБ-О и ВОЗ).

Критериями достоверности цитологического метода являются результаты сопоставления с плановым гистологическим исследованием. Наибольший процент совпадений цитологического заключения с окончательным гистологическим заключением наблюдается при исследовании образований кожи, молочной, щитовидной железы, при метастатическом поражении лимфатических узлов. Результаты исследования гиперпластических процессов в эндометрии неудовлетворительны (достоверность 30–50%) и заставляют искать пути совершенствования диагностики. Достоверность цитологической диагностики патологии шейки матки составляет 75–90%. 3–24% исследований, в зависимости от локализации и способа получения материала, оказываются неудачными из-за неадекватно полученного, неинформативного материала.

Таблица 1. Достоверность цитологических исследований
опухолей различных локализаций.

Локализация	% совпадения цитологического и гистологического диагноза	% совпадения по данным литературы	% неудавшихся пункций
Легкое	95,5-97	79-98	2,9-3,0
Молочная железа	95,8-97,4	90-96	2,6-8,3
Лимфатические узлы	98,4-98,7	90	1,6-10,7
Кожа	91,2-92,7	90-98	2,4-12,5
Мягкие ткани (без указания гистологического типа опухоли)	90,2-93,8	65-93,4	5-12,3
Желудочно-кишечный тракт	92,3-97,5	73-93,6	2,5-4,4
Щитовидная железа	85,5-93,2	57-94	1,6-4,2
Шейка матки	89,5-93,2	65-90	3,5-4,5
Эндометрий	78,9-84,8	30-90	3,8-15,4
Почка	86,2-89,3	76,4-91,3	7,1-11,5
Экссудаты	95,7-100	–	1,2-2,7

Уверенное цитологическое заключение о наличии злокачественного новообразования, совпадающее с клиническими симптомами и данными других диагностических исследований, расценивается как морфологическое подтверждение диагноза злокачественной опухоли. Это предъявляет к цитологическому методу высокие требования и заставляет искать пути предупреждения возможных ошибок. По характеру ошибки цитологов можно разделить на две большие группы: ложноотрицательные и ложноположительные. Ложноотрицательные заключения преобладают и приводят к гиподиагностике опухолевого процесса, чаще всего из-за небольшого количества информативного материала в пунктате. Имеются и объективные трудности в оценке изменений, связанные чаще с высокой дифференцировкой опухоли, например, практически невозможно диагностировать фолликулярный рак щитовидной железы с минимальной инвазией, трудно диагностируется тубулярный, маститоподобная форма долькового рака молочной железы.

Гипердиагностика опухолей на нашем материале многие годы не превышает 1%, однако может служить причиной ненужного, а иногда и калечащего лечения. Истинная гипердиагностика, то есть ложное цитологическое заключение о наличии опухоли, объясняется несколькими наиболее типичными причинами.

Выраженная пролиферация клеточных элементов является наиболее частой причиной гипердиагностики рака. Например, пролиферация эпителия протоков и долек молочной железы при фиброаденоме и пролиферирующем аденозе, особенно при укрупнении ядер, наиболее часто приводит к гипердиагностике рака молочной железы. Правильной диагностике помогает анализ ядерных характеристик клеток опухоли: наличие ровных контуров ядра и равномерное распределение хроматина.

Реактивные изменения эпителия служат также нередкой причиной неадекватной цитологической диагностики. Наиболее тяжелые ошибки встречаются при ангиомиолипоме почки, при которой реактивные изменения почечного эпителия с укрупнением и полиморфизмом ядер приводят к ошибочному диагнозу высокодифференцированного почечноклеточного светлоклеточного рака. Диагностике ангиомиолипомы помогает обнаружение сосудистых структур и веретенообразных клеток, экспрессирующих виментин, десмин, НМВ-45.

Хронический аутоиммунный тиреоидит типа Хашимото сопровождается образованием сосочковоподобных структур, к оценке которых необходимо подходить осторожно и помнить, что при этом процессе реактивные изменения эпителия можно ошибочно принять за папиллярный рак щитовидной железы. Для хронических дерматитов, язв характерны атипические реактивные разрастания многослойного плоского эпителия, нередко представляющие непреодолимые трудности в дифференциальной диагностике с высокодифференцированным плоскоклеточным раком. Выраженные дистрофические изменения клеток являются также одной из причин ошибочной цитологической диагностики. Например, выраженная жировая дистрофия гепатоцитов может привести к гипердиагностике метастаза почечноклеточного светлоклеточного рака, особенно при уже состоявшемся диагнозе рака почки.

Большую проблему цитологии представляет дифференциальная диагностика различных степеней диспластических изменений эпителия и внутриэпителиального рака. Присутствие при тяжелой дисплазии полиморфных крупных клеток с большими неправильно округлыми ядрами, иногда с увеличенными ядрышками, двуядерных клеток с тяжистым рисунком хроматина может быть неверно расценено как рак. При диспластических изменениях плоского эпителия необходимо учесть, что большинство клеток сходны с клетками глубоких слоев, крупные атипические клетки находятся в тесной связи с клетками без признаков атипии, имеются клетки стромы. Для объективизации дифференциальной диагностики различных степеней дисплазии и внутриэпителиального рака желательно проведение морфометрии клеток и ядер, что позволяет значительно снизить процент ошибочных заключений.

Нередко причиной гипердиагностики метастатического поражения в лимфатических узлах являются комплексы клеток укрупненного эндотелия и гистиоцитов, образующих эпителиоподобные структуры, а также наличие макрофагов с содержанием бурого пигмента. При затруднениях диагностики помогает иммуноцитохимическое исследование с небольшим набором антител (VIII фактор, цитокератины, ЭМА, НМВ-45), позволяющее подтвердить или отвергнуть наличие метастазов рака или меланомы.

Во избежание ошибок морфологической диагностики большое значение имеет четкое указание на характер проведенного лечения. Например, прием довольно распространенного антибиотика тетрациклина приводит к накоплению в клетках щитовидной железы бурого пигмента и ошибочному диагнозу метастаза меланомы. Прием мерказолила при зобе сопровождается резким полиморфизмом фолликулярного эпителия, что служит причиной цитологической и даже гистологической гипердиагностики фолликулярного рака. Проведение лучевой терапии вызывает выраженные изменения не только опухолевых клеток, но и нормального эпителия: укрупнение, полиморфизм клеток, патологическое ороговение, что является причиной гипердиагностики рака.

Имеются и объективные диагностические проблемы, например, в дифференциальной диагностике между эндометриоидной высокодифференцированной аденокарциномой и атипической гиперплазией эндометрия, себоррейной (базальноклеточной) кератомой и базально-клеточным раком, инфекционным мононуклеозом и болезнью Ходжкина, где достаточно высокий процент ошибочных заключений и требуется дальнейшая разработка цитологических критериев диагностики.

Знание клинической картины, характера проведенного лечения, применение современных методик морфологической диагностики с использованием иммуноцитохимии и морфометрии способствует сведению случаев гипердиагностики к нулю.

Вместе с истинной цитологической гипердиагностикой существует ложная гипердиагностика, когда цитолог дает уверенное заключение о злокачественном процессе, а при гистологическом исследовании опухоли не обнаруживается, то есть фактически имеет место гистологическая гиподиагностика. Пересмотр цитологических препаратов несколькими высококвалифицированными специалистами, повторное взятие биопсии, клиническое течение заболевания в дальнейшем подтверждают результаты цитологического исследования. Больше всего ложной цитологической гипердиагностики относится к исследованию биопсийного материала из бронхов и гортани, а также при исследовании лимфатическиих узлов, когда при цитологическом исследовании выявлялись единичные комплексы анаплазированных клеток, несомненно принадлежащих раку. При приготовлении гистологических препаратов эти комплексы теряются в готовых гистологических препаратах. Реальная потеря немногочисленных опухолевых клеток при приготовлении гистологических препаратов не допускает игнорирования клиницистом данных цитологического исследования и приводит к «золотому» стандарту – совместному цитологическому и гистологическому исследованию биоптата.

Интраоперационная цитологическая диагностика – одно из основных направлений цитологического метода исследования. Во время операции, используя цитологический метод, уточняется характер патологического процесса, степень распространенности с выявлением метастазов в лимфатические узлы, печень и другие органы, производится контроль радикальности выполненной операции с исследованием краев резекции. Роль цитологии возрастает при разработке показаний к расширенным лимфоаденэктомиям и при определении так называемых «сторожевых», или «сигнальных», лимфатических узлов, которых может быть шесть, и применение гистологического метода невозможно из-за длительности исследования. По данным ведущих клиник, ошибка срочного гистологического исследования «сторожевых» лимфатических узлов составляет 25%, поэтому они рекомендуют использовать интраоперационное цитологическое исследование отпечатков с поверхности разрезанного лимфатического узла. По нашим данным, достоверность срочного цитологического исследования по выявлению метастатического поражения лимфатических узлов составляет 97-99%.

Надо отметить, что к срочному морфологическому исследованию могут быть противопоказания. Срочное интраоперационное морфологическое исследование не рекомендуется выполнять при подозрении на внутриэпителиальный рак с ограниченным очагом поражения из-за того, что не останется материала для планового гистологического исследования. Цитологические критерии внутриэпителиального рака только разрабатываются, и цитолог может дать заключение о раке, не указывая, что это Carcinoma in situ. При внутрипротоковых папилломах небольшого размера срочное гистологическое исследование лучше не выполнять, а цитологическое исследование достоверно поможет установить характер процесса.

При срочной морфологической диагностике существенно помогает макроскопическое исследование операционного материала. Опытный морфолог при визуальном исследовании уже может поставить диагноз, но для подтверждения диагноза необходимо микроскопическое исследование. Например, опухолевый узел классической звездчатой формы может быть при трех совершенно разных процессах: при раке, склерозирующем аденозе с центром Семба и липогранулеме. И только микроскопическое исследование позволяет правильно поставить диагноз.

Цитологический метод позволяет в динамике, не травмируя пациента, изучать лечебный патоморфоз при химиолучевой и фотодинамической терапии.

XX столетие названо в медицинских кругах веком цитопатологии. Оценивая возможности цитологического метода, можно сказать, что есть еще возможности его развития в комбинации с другими дисциплинами и методами.

Иммуноцитохимическое исследование нередко является решающим в дифференциальной диагностике новообразований, когда при рутинном исследовании возникают непреодолимые трудности для установления гистогенеза отдельных опухолей, определения источника метастазирования, трактовки первично-множественных поражений.

За последние годы достигнут огромный прогресс в клиническом использовании различных биологических маркеров. В отличие от сывороточных маркеров, клеточные маркеры определяются непосредственно в опухолевых клетках ИЦХ исследованием, в основе которого лежит реакция антиген-антитело. В их числе онкогены, рецепторы эстрогенов и прогестерона, молекулы, опосредующие апоптоз, рецепторы факторов роста и т. д. Все эти показатели позволяют более детально изучить молекулярно-биологические особенности опухолевых клеток, ассоциированные со степенью дифференцировки, способностью к инвазии и метастазированию, чувствительностью к химиотерапии, и, следовательно, с особенностями течения и прогнозом заболевания в каждом конкретном случае.

Специфических маркеров дифференциальной диагностики злокачественных и доброкачественных опухолевых процессов не существует, но на сегодняшний день активно ведутся научные изыскания в решении этой проблемы. Так, равномерное окрашивание герминативных центров лимфоидных фолликулов с использованием антител bcl-2 указывает на фолликулярную лимфосаркому, в то время как негативная реакция свидетельствует о доброкачественном гиперпластическом процессе; реакция с антителами HBME-1 при ИЦХ исследовании опухолей щитовидной железы часто положительная в злокачественных новообразованиях и практически отсутствует при доброкачественных, в дифференциальной диагностике широко применяют галектин-3, экспрессирующийся карциномами щитовидной железы из А-клеток (папиллярный, фолликулярный) с отсутствием экспрессии в фолликулярных аденомах, зобах и нормальной ткани щитовидной железы.

Для установления гистогенеза и дифференциальной диагностики опухолей разработаны и постоянно совершенствуются, схемы C.R.Taylor и R.J. Cote (1994 г.). Разнообразие моноклональных антител, используемых в иммуноцитохимических исследованиях тонкоигольных пунктатов, в каждом конкретном случае позволяет ответить на вопрос, имеет ли данная опухоль эпителиальное происхождение или является саркомой, меланомой, лимфомой. Иммуноцитохимия широко применяется для иммунофенотипирования злокачественных лимфом, без чего, по современным канонам, невозможно начать лечение.

Иммуноцитохимическое исследование помогает в определении источника метастазирования при невыявленном первичном очаге. К сожалению, органоспецифических маркеров не так уж и много. К их числу могут быть отнесены специфический антиген предстательной железы (ПСA), позволяющий идентифицировать метастазы рака простаты более чем в 95% случаев; тиреоглобулин, экспрессирующийся в 92–98% фолликулярного и папиллярного рака щитовидной железы, и кальцитонин, экпрессирующийся в 80% медуллярных раков щитовидной железы В некоторых случаях рак щитовидной железы может экспрессировать и кальцитонин, и тиреоглобулин, что только с помощью иммуноферментной диагностики позволяет диагностировать диморфные А-С-клеточные раки.

Одним из первых показателей, вошедших в практику лечения больных раком молочной железы (РМЖ), и относящихся к категории клеточных маркеров, были рецепторы стероидных гормонов. Рецепторы стероидных гормонов – это белки, специфически и избирательно связывающие соответствующие стероиды после их проникновения в клетку.

По данным ВОЗ (2003 г.), экспрессия рецепторов эстрогенов (РЭ+) и прогестерона (РП+) в инвазивных протоковых раках составляет 70-80%; инвазивный дольковый рак в 70-95% экспрессирует РЭ, в 60-70% -РП, 100% экспрессия РЭ отмечена в инвазивном криброзном, муцинозных опухолях молочной железы. Эдокринная терапия наиболее эффективна у больных с первичными опухолями с высоким уровнем рецепторов стероидов. При метастатических поражениях степень реакции на эндокринную терапию также зависит от наличия РЭ и РП в опухоли: её эффективность составляет около 10–15% при гормонотрицательных опухолях, 27% при опухоли с РЭ+ и РП-, 46% при статусе РЭ- и РП+ и 75% при опухолях, содержащих РЭ+ и РП+. Рецепторположительные опухоли молочной железы имеют более высокую дифференцировку и более благоприятный прогноз.

Необходимо отметить, что рецепторы гормонов в доброкачественных образованиях молочной железы еще мало изучены. Отмечено повышение числа РЭ+ клеток в нормальной ткани молочной железы с увеличением возраста, а также при склерозирующем аденозе, папилломах, фиброаденомах и листовидных опухолях. Коэкспрессия РЭ+/Ki-67+ с разной степенью выраженности и соотношения большей частью выявлялась в патологии, связанной с риском развития РМЖ.

Рецепторы эстрогенов экспрессируются в клетках рака эндометрия, яичников, шейки матки, щитовидной железы, кишечника, нейроэндокринных опухолей, в том числе карциноидов.

Иммуноцитохимическое исследование позволяет на дооперационном этапе установить важнейшие факторы прогноза опухолевого процесса и скоррегировать схемы лечения. Пролиферативная активность многих новообразований оценивается с помощью антител Ki-67 в злокачественных лимфомах, опухолях молочной, предстательной, поджелудочной железы, легких, гипофиза, толстой кишки. Обнаружена связь между значениями индекса пролиферации и степенью гистологической дифференцировки опухоли и клиническим прогнозом при раке эндометрия, яичников, легкого, молочной железы, мочевого пузыря, лимфомах, опухолях нервной системы.

Гиперэкспрессия онкопротеина C-erbB-2(HER2/neu), являющегося рецептором эпидермального фактора роста 2-го типа, придающего клеткам свойство неограниченного деления, служит фактором риска рецидива заболевания для ряда опухолей: рака молочной железы, толстой кишки, лёгкого и др. Экспрессия онкобелка C-erbB-2 при ИГХ исследовании обнаруживается в 15–40% РМЖ. Выявление онкопротеина C-erbB-2, по мнению некоторых авторов, ассоциируется с высокой степенью злокачественности опухоли, отсутствием РЭ и РП, высокой митотической активностью, устойчивостью к химиотерапии и требует назначение герцептина.

Наличие метастазов в лимфатических узлах при опухолевом поражении является главным дискриминирующим прогностическим признаком. С помощью иммуноцитохимического исследования можно выявить единичные циркулирующие кератин-положительные клетки РМЖ в костном мозге и периферической крови. Применение ИЦХ исследования повышает выявляемость микрометастазов в лимфатических узлах на 3,2–24%.

Иммуноцитохимические реакции оцениваются как качественно при уточнении гистогенеза опухоли, наличии метастаза в лимфатическом узле или другом органе, иммунофенотипировании лимфом, так и количественно – при оценке пролиферативной активности, экспрессии рецепторов гормонов в опухоли, онкопротеина С-erbB-2 и т.д. Иммуноцитохимическая реакция может быть ядерной, цитоплазменной и мембранной. Ядерная реакция проявляется интенсивным окрашиванием ядра и бывает при определении РЭ и РП, Ki–67, PCNA, p53 и т.д. Цитоплазменная реакция характеризуется диффузным окрашиванием цитоплазмы или отложением гранул в виде грубых пятен и зерен. Цитоплазменное окрашивание дают хромогранин, синаптофизин, белок S-100, виментин, десмин, тиреоглобулин, кальцитонин, цитокератины, bcl-2 и т.д. Оценка этой реакции требует большой осторожности и контроля, так как фоновое окрашивание цитоплазмы клеток может быть принято за истинную реакцию. Мембранное окрашивание наблюдается при проведении реакции с онкопротеином C-erbB-2 и ЭМА (эпителиальным мембранным антигеном). Окрашивание в таких случаях только цитоплазмы не должно учитываться как экспрессия антигена. Маркер крупноклеточной анаплазированной лимфомы CD-30 может экспрессироваться как в цитоплазме, так и на мембране клетки.

Для количественной оценки экспрессии маркера Мс. Carthy и соавторы разработали систему подсчета Histo score (H.S.). Система подсчета включает интенсивность иммуноцитохимической окраски, оцениваемую по 4-балльной шкале, и долю окрашенных клеток и представляет собой сумму произведений процентов, отражающих долю клеток с различной интенсивностью окраски на балл, соответствующий интенсивности реакции. Интенсивность окраски в баллах: 0 – нет окрашивания, 1 – слабое окрашивание, 2 – умеренное окрашивание, 3 – сильное, 4 – очень сильное окрашивание. Формула подсчета:

Histochemical score = ∑ P(i)×i (гистосчет),

где i – интенсивность окрашивания, выраженная в баллах от 0 – 4,
Р(i) – процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью.

Максимальное количество Histo score соответственно должно быть 400. Подсчет проводится в трех когортах по 100 опухолевых клеток в различных полях зрения (объектив х 40).

В практической работе допустимо использование полуколичественной оценки. Реакция считается отрицательной при полном отсутствии или экспрессии антигена менее 5%–10% опухолевых клеток, слабоположительной – от 5%–10% до 24% клеток, умеренно положительной – в 25%–75%, выраженной – более чем в 75% клеток. При оценке иммуноферментной реакции принимают во внимание интенсивность и полноту окрашивания цитолеммы клеток в центре опухолевого очага. Так, яркая, мембранная, беспрерывная по контуру клетки реакция обозначает выраженную экспрессию белка С-erbB-2 (+++), что в 95% случаев подтверждается амплификацией гена С-erbB-2, выявляемой с помощью FISH (флуоресцентной гибридизацией in situ).

Сопоставляя данные иммуноцитохимических исследований различных опухолей с целью уточнения гистогенетической принадлежности и результатов послеоперационных морфологических заключений, получены следующие результаты: 89% совпадений при анализе опухолей щитовидной железы, 83% при уточнении гистогенеза первичной опухоли и метастазах в лимфатических узлах, 89% – при опухолях мягких тканей и кожи и 100% – при исследовании биологических жидкостей. При определении гормонального статуса РМЖ процент совпадения ИЦХ и ИГХ исследований составляет 88,3%, при исследовании пролиферативной активности – 83%, при определении онкопротеина C-erbB-2 – 93,2%.

При сравнении возможностей ИЦХ исследования при выполнении пункционной биопсии и ИГХ исследования при трепанобиопсии преимущества ИЦХ, на наш взгляд, несомненны. Пункционная биопсия – более простая процедура, не сопровождается такими осложнениями, как воспаление, кровотечение, и позволяет получить полноценный клеточный материал. При неудачной пункции и попадании в некроз, строму опухоли, окружающие ткани можно практически безболезненно повторить процедуру. Кроме того, отсутствует потеря и маскировка антигенов при проводке и депарафинизации материала с использованием агрессивных химических реагентов.

Использование иммуноцитохимического исследования позволяет расширить возможности морфологических методов и на дооперационном этапе уточнить гистогенез, диагностировать первично-множественные поражения, степень распространения и оценить некоторые показатели прогноза и чувствительность опухоли к химиогормонотерапии.

На современном этапе развития в цитологии используются методы молекулярной и генной диагностики: гибридизация in situ, Southern Blotting, Nothern Blooting, Western Blotting, DNK Microarray и т.д) В научной и практической работе цитологи применяют проточную цитофотометрию.

Одним из путей совершенствования цитологического метода исследования является применение морфометрии, что позволяет получать объективные количественные параметры. Например, при обработке на компьютере выделены наиболее информативные морфометрические признаки, относящиеся к параметрам ядра с использованием основных диагностических морфометрических признаков: площадь, периметр, оптической плотности, коэффициент поляризации ядер, числа ядрышек, их площади и периметра. Разработаны объективные морфометрические признаки различных степеней дисплазии при дисгормонально-гиперпластических процессах молочной железы, шейки матки, что уменьшило долю субъективизма в определении различных степеней дисплазии.

Развиваются новые методы микроскопии: фазово-контрастная, флюоресцентная, конфокальная и т.д. Создание компьютерных систем обучения, развитие метода телеконсультации также предъявляют новые требования и, несомненно, будут способствовать развитию и совершенствованию цитологического метода диагностики.

Волченко Надежда Николаевна
д.м.н., профессор, руководитель отделения
онкоцитологии МНИОИ им.П.А.Герцена

Цитологическое исследование — метод, помогающий выявить рак на ранней стадии

При выявлении ракового заболевания на ранней стадии шансы выздоровления повышаются до 95%. Цитологическое исследование относят к высокоточной морфологической диагностике рака. Это безопасный и быстрый способ выявить злокачественную опухоль еще до того, как она разрастется и пустит метастазы.

Что представляет собой цитологический метод диагностики

Цитология изучает строение и функции клеток. Соответственно, цитологическая диагностика предполагает лабораторное исследование под микроскопом клеточного материала тканей, органов, жидкостей, из которых состоит организм человека. Любые изменения в строении клеток, ядре, цитоплазме, их функционировании свидетельствуют об отклонениях в работе организма.

Раковые заболевания вызывают нарушения в клеточной структуре. По этим нарушениям специалисты могут судить о наличии или отсутствии злокачественной опухоли. Таким образом, цель цитологического исследования — подтвердить или опровергнуть рак.

Нередко цитологическую диагностику проводят параллельно с гистологической. Отличие этих методов — в материалах для исследования. Гистология изучает срезы тканей органов, для забора образца биоматериала применяют биопсию (чаще всего пункционную). Цитология в ряде случаев менее травматична, так как материалами служат смывы, соскобы, мазки, выделения, жидкости (например, моча), получить которые проще. Однако гистологический метод все же считается более точным и информативным, так как дает возможность изучить саму ткань новообразования.

Преимущества цитологического анализа

1. Высокая точность и однозначность результатов.
2. Эффективность на самых ранних стадиях рака, когда болезнь еще не проявляет себя.
3. Выявление любых видов раковых заболеваний.
4. Получение разноплановой информации о характере опухоли, ее строении, степени атипии клеток.
5. Точная дифференциация злокачественных и доброкачественных опухолей.
6. Получение биоматериалов для исследования с минимальным травматизмом для тканей.
7. Возможность составления точного плана лечения или его коррекции.
8. Минимальное количество времени для получения результатов.

В каких случаях проводят цитологическую диагностику

1. Регулярный онкологический скрининг.
2. Постановка точного диагноза заболевания.
3. Необходимость дифференцировать злокачественную и доброкачественную опухоль.
4. Наблюдение динамики онкологического процесса.
5. Уточнение диагноза во время хирургической операции.
6. Коррекция программы лечения и контроль ее результатов.

Хотите мы вам перезвоним?

Какие материалы используют

Забор биоматериалов для цитологического анализа проводят тремя методами.

Эксфолиативный

Клетки слущивают с поверхности биоматериала с помощью специальных лабораторных инструментов. Материалом может служить любая жидкость, выделяемая организмом. Образцы также получают с помощью мазков, соскобов с пораженного участка кожи, внутренних органов (например, матки). Для этого применяют тампоны или специальные щетки. Также исследуют смывы из полых органов, полученные с помощью физраствора, ферментированных растворов.

Пункционный

Забор биоматериала осуществляют из внутренних органов с помощью тонкой пункционной иглы. Этим методом получают образцы клеток лимфоузлов, молочной, щитовидной желез, костного мозга, различных полостей, а также новообразований, расположенных на периферии легкого. К пункционным биообразцам относят содержимое кист, плевральную, перикардиальную жидкости. Для получения и препарирования материала применяют сложные способы смывов, соскобов.

Эндоскопический

Биоматериал забирают во время эндоскопического исследования и биопсии внутренних органов. С помощью специальной аппаратуры извлекают образцы тканей. Затем в лаборатории с них снимают мазки, которые и подвергают исследованию.

Как проводят цитологический анализ при раковых заболеваниях

Рак легкого

Чтобы получить биоматериал, используют эндоскопический метод – бронхоскопию. В ходе процедуры делают мазок или биопсию. Также применяют трансторакальную пункцию с последующим изучением мазков биоматериала. Этот метод подходит и для определения метастазов в легких. В ряде случаев достаточно 5-кратного исследования мокроты, однако точность результатов в данном случае ниже.

Рак органов ЖКТ

При раке желудка, пищевода биоматериал можно получить с помощью смывов физраствором или в ходе эндоскопического исследования — фиброэзофагогастроскопии. Для забора материала при раке кишечника применяют ректороманоскопию, фиброколоноскопию.

Рак шейки и тела матки

Для получения материала при подозрении на рак шейки матки достаточно соскоба с поверхности органа во время осмотра у гинеколога. Метод эффективен при профилактической диагностике и очень информативен (точность – до 97%). Для исследования тела матки используют смыв или аспирацию тонкой иглой.

Рак молочной железы

Материалом для исследования могут служить выделения из соска, пунктат, отпечаток со взятого при биопсии образца, соскоб из ткани молочной железы или эрозивной поверхности.

Рак кожи

Биоматериал забирают относительно простыми способами — соскобом или отпечатком. Если в новообразовании скапливается жидкость, забор проводят пункционной иглой.

Цитологическое исследование в Онкологическом центре «СМ-Клиника»

В онкоцентре действует собственная лаборатория с высокоточным оборудованием, позволяющим проводить цитологический анализ в соответствии с международными стандартами.

Забор материала и лабораторные исследования осуществляют квалифицированные специалисты с опытом от 10 лет, которые работают с любыми видами онкологических заболеваний.

Пациент в минимальные сроки получает результат в бумажном или цифровом виде.Биообразцы хранятся в специальных условиях, поэтому возможно проведение повторных исследований.

Пройти диагностику в Онкологическом центре «СМ-Клиника» можно после предварительной записи. Достаточно оставить заявку на сайте или позвонить: +7 (495) 777-48-49

Анализ на цитологию: о чем расскажут клетки нашего тела

Ежедневно в России около тысячи человек умирает от рака, а в мире это число составляет более 20-ти тысяч. Печально осознавать, что многих больных удалось бы спасти, если бы диагноз был поставлен на ранних стадиях. Поэтому своевременное выявление онкологических заболеваний является одной из важнейших задач медицины. Один из способов диагностировать рак и предраковые состояния был открыт еще в середине ХХ века: достаточно «спросить» клетки нашего организма.

Что означает понятие «анализ на цитологию»

Как многим известно еще из школьного курса, цитология — наука, изучающая клетки организма. Цитологическое исследование, в свою очередь, позволяет обнаружить аномалии в состоянии, строении и функционировании клеток и на основании этих данных поставить диагноз либо проконтролировать течение болезни, определить успешность лечения. Клетки «расскажут» о многих проблемах в исследуемых тканях: о воспалениях, бактериях, инфекциях и различных новообразованиях.

Анализ на цитологию обладает следующими достоинствами:

• высокая точность;
• минимальная степень вмешательства в организм;
• не требует особой сложной подготовки;
• небольшая цена исследования;
• быстрое получение результата.

Главным же недостатком исследования клеток является необходимость забора материала непосредственно из пораженных участков организма. Это создает определенные сложности в тех случаях, когда дислокация воспаления или опухоли неизвестна, при том что симптомы указывают на наличие такой патологии у пациента.

Когда назначается цитологическое исследование

Как мы выяснили, анализ на цитологию незаменим в первую очередь при определении опухолей и предраковых состояний, но также позволяет выявить многие воспалительные, инфекционные и аутоиммунные заболевания. Поэтому он успешно применяется во многих областях медицины: онкологии, гинекологии, хирургии.

Цитологическое исследование назначают в следующих случаях:

• для профилактики заболеваний. Например, гинекологи рекомендуют сдавать анализ на цитологию ежегодно, для своевременного выявления новообразований, воспалений и инфекций;
• для диагностики. Цитологическое исследование позволяет выявить характер патологии, определить наличие опухолей и их природу, обнаружить сопутствующие заболевания. Анализ в диагностических целях назначает врач для подтверждения или опровержения предварительного диагноза;
• для контроля. При проведении курса терапии пациенту назначают цитологическое исследование, чтобы следить за динамикой заболевания, при необходимости вносить изменения в план лечения, а также подтвердить выздоровление. Для онкобольных периодическое проведение анализа на цитологию позволяет выявить рецидивы.

Какой биоматериал исследуется?

Поскольку весь наш организм состоит из клеток, для цитологического исследования может быть использован практически любой биоматериал. Однако, как уже было сказано, для получения точного результата материал должен быть получен из предполагаемого очага болезни, то есть содержать в себе пораженные клетки.

Таким образом, в зависимости от того, какой орган исследуют, в качестве объекта анализа выступают следующие типы биоматериалов:

• эксфолиативные — моча, мокрота, кровь, промывные воды, соскобы с шейки матки, с поверхности язв и ран, секреты желез, экскреты, транссудаты, экссудаты и др.;
• пунктаты , то есть биоматериалы, получаемые с помощью пункции щитовидной железы, лимфатических узлов, молочной железы, кожи, суставов, плевральной полости и т.д.;
• операционный материал . В эту группу входят отпечатки и соскобы с удаленных тканей, а также с различных надрезов, полученные в ходе хирургического вмешательства.

Как проводится анализ на цитологию

Итак, цитологическое исследование начинается с взятия биоматериала одним из вышеперечисленных методов. В традиционной цитологии полученный образец сразу переносят на стекло, подсушивают или фиксируют специальным веществом и передают в лабораторию. К сожалению, такое обращение приводит к повреждению клеток, и как следствие — нередким ложноотрицательным результатом. Изменить подход помогло появление жидкостной цитологии — метода исследования, при котором биоматериал сразу же помещается в специальный консервирующий раствор. Это не только помогает сохранить клетки в целости, но и значительно увеличить срок годности образцов.

Обратите внимание
Подготовка биоматериала является одним из важнейших моментов в повышении точности исследования. Точность метода традиционной цитологии составляет всего 34,5–89%, в то время как жидкостная цитология позволяет получить результат с точностью до 98%. Поэтому перед анализом обязательно уточняйте, по какому методу проводится исследование.

После фиксации образца или приготовления препарата по жидкостному методу мазки обычно окрашивают одним из способов:

• по Папаниколау (ПАП-тест) — самый распространенный способ окраски в мире. Эффективен при выявлении онкологических и вирусных заболеваний (например, ВПЧ).
• по Романовскому — в России чаще всего применяется в модификации Лейшмана. В результате такого окрашивания четче видно ядро клетки, что позволяет выявить бактерии и простейших.

Затем полученный образец подвергают исследованию под микроскопом. В процессе осмотра врач выявляет аномалии в количестве, строении и расположении клеток и фиксирует полученные данные в заключении. Например, для ПАП-теста указывают 1–5 тип изменений клеток, где 1 означает норму, то есть отсутствие патологий, а 5 — наличие большого числа раковых клеток в эпителии.

Заключение внизу бланка анализа обычно формируется с использованием общепринятой терминологической системы Бетесда, в которой каждый показатель указан в виде аббревиатуры. Система является мировым стандартом и будет понятна врачам в большинстве стран.

Сколько времени требуется микробиологу на анализ

Как уже было сказано, анализ на цитологию проводится достаточно быстро: как правило, срок составляет до пяти дней. В некоторых случаях (зависит от метода и исследуемого биоматериала), результат можно получить уже на следующий день.

При этом само исследование длится недолго, а вот клиника может задерживать получение бланка анализа пациентом до недели и больше (обычно так происходит, если у больницы нет своей лаборатории — на это тоже стоит обратить внимание при выборе центра диагностики).

Как прочитать бланк результатов цитологического исследования

Большинство пациентов, получив на руки результаты анализов, стремятся изучить их самостоятельно, не дожидаясь консультации специалиста. Конечно, так делать не стоит.

Мы приведем лишь список основных значений по Бетесду:

Сокращение по Бетесду	Расшифровка
NILM	Отсутствие интраэпителиального поражения или злокачественности
AGC	Атипичные железистые клетки
AGC, favor neoplastic	Атипичные железистые клетки, похожие на неопластичные
AGUS-NOS	Атипичные железистые клетки неопределенного значения
AIS	Эндоцервикальная аденокарцинома in situ
ASC	Атипичные клетки плоского эпителия
ASC-US	Атипичные клетки плоского эпителия неясного значения
ASC-H	Атипичные клетки плоского эпителия, не позволяющие исключить HSIL
CIN 1, 2, CIN 3	Цервикальная интраэпителиальная неоплазия 1, 2 или 3 степени
CIS	Карцинома in situ
SIL	Плоскоклеточное интраэпителиальное поражение
HSIL	Высокая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения
LSIL	Низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения
NOS	Не определенные иначе
SIL	Плоскоклеточное интраэпителиальное поражение
VaIN	Вагинальная интраэпителиальная неоплазия
VIN	Интраэпителиальная неоплазия вульвы

Расшифровку ПАП-теста мы приводили выше.

Помните, что расшифровка результатов анализа на цитологию должна проводиться опытным специалистом, с учетом данных других исследований. Самодиагностика и тем более самолечение абсолютно недопустимы, ведь на кону ваша жизнь и здоровье.

Анализ на цитологию является простым, быстрым и недорогим способом исследования организма на онкозаболевания, воспалительные процессы и инфекции. Однако его точность в огромной степени зависит от подготовки медицинских работников, берущих биоматериал, от метода исследования и качества оборудования в лаборатории.

какие анализы надо сдать чтобы выявить онкологию

Рак — это заболевание, которое требует комплексного подхода к диагностике. Достоверно поставить такой диагноз можно только после комплекса исследований. Но заподозрить это заболевание помогут обычные анализы, которые легко пройти практически в любой лаборатории. Именно лабораторная диагностика помогает определить, с каким органом связаны возможные проблемы, и уже целенаправленно искать их причину.

Общий анализ крови: покажет ли он рак?

Злокачественная опухоль — это активно растущая ткань, которая требует большого количества «строительного материала» и энергии. Она активно потребляет вещества, нужные для роста организма, и выделяет продукты обмена, в том числе обладающие токсичностью. С этими двумя процессами и связаны основные изменения, которые можно увидеть в результатах анализа крови.

Интоксикация приводит к повышению СОЭ, увеличению количества нейтрофилов и снижению числа лимфоцитов. Если эти признаки сопровождаются слабостью, утомляемостью, потерей аппетита и похуданием, нужно как можно скорее исключить самый серьезный диагноз. Наиболее ярко такое сочетание признаков проявляется при некоторых формах лимфогранулематоза, при гистиоцитозе и нейробластомах [1] .

При опухолях внутренних органов часто страдает система кроветворения, снижается гемоглобин [2] . Токсическое действие продуктов жизнедеятельности опухолевых клеток повреждает мембраны эритроцитов, из-за чего в крови могут появляться их патологические формы — эхиноциты [3] . При раке костного мозга обнаруживают незрелые клетки крови.

Анализ крови при раке проводится так же, как и при любом другом заболевании. В процедурном кабинете у пациента забирают цельную кровь в специально подготовленную пробирку. Сдавать биоматериал нужно натощак или хотя бы через 4 часа после еды. Результат будет готов через 1–2 рабочих дня.

Специфичность такого исследования невысока, и поставить диагноз «рак» по результатам одного только анализа крови нельзя. То же повышение СОЭ всегда наблюдается при воспалении. Анемия может возникнуть при недостаточном питании, дефиците железа или при других болезнях.

Общий анализ мочи при диагностике онкологических заболеваний

В анализе мочи при онкологии редко появляются специфические изменения. Но любые отклонения в результатах — это повод провести более тщательное обследование.

Кровь в моче является ранним симптомом рака мочевого пузыря или мочевыводящих путей. Но она также может появиться при мочекаменной болезни или гломерулонефрите.

Кетоновые тела говорят об усиленных процессах катаболизма, то есть распада тканей. Этот признак может появиться как при опухолевом процессе, так и, например, при сахарном диабете или во время диеты.

Для проведения анализа собирают утреннюю порцию мочи в стерильный контейнер. Перед тем как собрать материал, нужно принять душ, чтобы клетки с поверхности кожи не попали в контейнер.

Уже через 1–2 дня будет готов результат, с которым нужно обратиться к врачу. По одному анализу мочи поставить диагноз и даже заподозрить онкологию невозможно. Нужно учитывать другие результаты анализов и обследований, а также имеющиеся симптомы.

Биохимический анализ крови: сигналы опухолевого процесса

В биохимическом анализе крови для диагностики рака наиболее важны семь показателей [4] :

• Общий белок и альбумин . Опухоли активно потребляют белок, из-за этого его уровень в крови снижается. Плюс к этому часто теряется аппетит, строительный материал для клеток перестает поступать в организм в достаточном количестве. А если рак поражает печень, то производство белка в организме значительно снижается даже при нормальном питании.
• Мочевина . Повышение этого показателя в крови говорит об ухудшении функции почек или об активном распаде белка. Это может происходить как при опухолевой интоксикации, так и при распаде опухолевой ткани, в том числе при эффективном лечении рака.
• Изменение уровня сахара в крови может наблюдаться при саркомах, раке легких, печени, органов репродуктивной системы, других видах онкологии. Опухолевые клетки тормозят выработку инсулина, организм начинает несвоевременно реагировать на повышение концентрации глюкозы. В результате еще за несколько лет до первых клинических симптомов рака могут появиться признаки сахарного диабета. Особенно часто это происходит при раке молочной железы и матки. [5]
• Билирубин повышается при повреждении печени, в том числе при ее онкологическом поражении.
• АлАТ — фермент, который может повышаться как при опухолевом поражении печени, так и при других заболеваниях.
• Повышение щелочной фосфатазы — признак опухолей костной ткани, метастазов в костях, поражения печени, желчного пузыря основной опухолью или метастазами. [6]

Кровь для этого исследования забирают из вены. Желательно биоматериал сдавать утром до завтрака, иначе можно получить ложный результат. Это достаточно быстрый анализ и его результаты можно будет узнать уже через 1–2 дня.

Однако специфичность биохимического анализа также очень низкая. Изменения в анализе крови при онкологии не позволяют однозначно поставить диагноз. Скорее любые нарушения являются сигналом для врача провести более тщательную диагностику определенных систем или органов.

Анализы на свертываемость крови при раке

При онкологии значительно повышается свертываемость крови, возрастает риск возникновения тромбозов крупных сосудов и образования микротромбов в капиллярах.

Историческая справка
Впервые связь онкологических заболеваний с повышенным тромбообразованием была выявлена А. Труссо в 1861 году. С тех пор эта теория не ставилась под сомнение, а только подтверждалась новыми научными данными [7] .

Образование микротромбов в свою очередь ухудшает течение онкологического процесса. Круг замыкается. Были проведены серьезные исследования, которые показали, что применение препаратов, уменьшающих свертываемость крови, улучшает выживаемость онкологических больных даже при далеко зашедшем злокачественном процессе [8] .

Для выявления нарушений свертываемости исследуется коагулограмма. Для этого анализа также понадобится кровь из вены. А результаты будут готовы через 1–3 рабочих дня.

Иммунологический анализ крови: ключевой метод анализа при раковых заболеваниях

Анализ крови на маркеры раковых опухолей позволяет заподозрить онкологию на ранней стадии, оценить динамику заболевания, вовремя определить рецидив или появление новых метастазов, оценить эффективность лечения.

Онкомаркерами называют вещества, которые связаны с жизнедеятельностью опухоли и в организме здорового человека или не определяются совсем, или содержатся в очень малом количестве. Известно более 200 подобных веществ [9] . Но не все они одинаково успешно определяются в медицинской практике.

На заметку
В 2017 году в целях раннего выявления почечно-клеточного рака были разработаны методики определения новых онкомаркеров — аквапорина-1 и перилипина-2. Методы обладают 95-процентной чувствительностью и 91-процентной специфичностью [10] .

Несмотря на то, что определение онкомаркеров приобрело известность как «анализ крови на рак», их обнаружение не говорит со 100% гарантией о наличии этого заболевания и требует дополнительного обследования.

Для диагностики опухолей по анализу крови самые значимые маркеры — это α-фетопротеин и β-хорионический гонадотропин, которые определяются при некоторых видах опухолей яичника, тела и шейки матки. А также простатспецифический антиген PSA, который повышается при раке простаты.

Вторым по значимости следует СА-125, который выявляют при серозном раке яичников. Менее широко используют другие онкомаркеры:

• при опухолях молочной железы определяют РЭА, СА-15-3 и СА-72-4;
• при подозрении на рак шейки матки дополнительно к альфа-фетопротеину и ХГТ определяют SCC;
• при раке толстого кишечника — СЕА и СА-72-4;
• при подозрении на опухоль желудка — СЕА, СА-72-4 и СА-19-9;
• при подозрении на рак поджелудочной железы — СА-19-9 и СА-242;
• при раке щитовидной железы — hTERT, EMC1, TMPRSS4, галектин-3, EGFR, HBME-1;
• при раке мочевого пузыря в моче определяют ВТА, UBC, NMP-22 [11] .

Анализ крови на маркеры рака проводится натощак или через 4 часа после еды. Кровь забирают из вены. Анализ проводится в течение 1–2 рабочих дней. Если результат нужен срочно, его могут сделать за несколько часов.

Цитологические исследования: неотъемлемая часть онкодиагностики

Из всех методов лабораторной диагностики рака цитология обладает самой высокой специфичностью. С помощью цитологии можно практически всегда достоверно поставить диагноз и определить тип опухоли. Чувствительность этого метода зависит от вида рака и от того, насколько качественно взят материал для исследования. Например, если в промывные воды не попали раковые клетки, исследование даст отрицательный результат, хотя сама опухоль может развиваться.

При проведении исследования врач учитывает более 180 различных признаков атипии клеток. Такой анализ позволяет не только сказать, есть ли признаки онкологического процесса, но и определить источник опухоли, ее гистологический вариант, отличить первичную опухоль от метастаза [12] .

Цитологическое исследование проводят при опухолях практически любой локализации — кожи, легких, яичников, матки, лимфоузлов, костного мозга, печени, при любых подкожных образованиях.

Для исследования можно брать мазки-отпечатки с поверхности кожи или слизистых, мазки с шейки матки или из влагалища, мокроту, мочу, любое другое отделяемое. С целью исследования очагов, расположенных под поверхностью кожи, проводится пункция — материал забирают с помощью шприца с иглой. С помощью пункции можно забрать биоматериал из щитовидной железы, лимфатических узлов, костного мозга, участков печени, из любых других образований [13] .

Результаты цитологического исследования обычно выдаются через неделю после забора пробы. Бывают случаи, когда полученные препараты врачи показывают своим коллегам, сравнивают с архивом. Тогда исследование может затянуться до двух недель. Но в этом случае стоит подождать, ведь чем более тщательно проведено исследование, тем более точным будет результат.

Общий, биохимический анализ и коагулограмма не помогут выявить рак по одному анализу крови. Но с их помощью можно определить те органы, которые требуют особого внимания, и спланировать полноценное обследование. То же касается и анализа мочи.

Анализ крови на онкомаркеры может дать больше информации, связанной именно с возможностью развития раковой опухоли. Но и его нельзя рассматривать отдельно от общего состояния. Лучше проводить исследование сразу на несколько опухолевых маркеров, которые говорят об определенном виде рака, — это повысит достоверность диагностики.

Не стоит полагаться на какое-то одно исследование. Идеальный вариант для ранней диагностики рака — это регулярный профилактический осмотр, который включает в себя как анализы крови и мочи, так и ультразвуковое исследование, флюорографию, обследование молочных желез у женщин и посещение гинеколога или уролога.

методы, виды, особенности патоморфологического исследования

Злокачественные новообразования — это группа заболеваний, насчитывающая несколько тысяч видов опухолей разных типов и разной степени злокачественности. Они подразделяются на большие группы в зависимости от того из каких тканей они развиваются: если из эпителиальных (барьерных) — то это раки, если из соединительных тканей (мягких тканей и костей) – саркомы, если из лимфоидных (иммунных) – лимфомы/лейкозы. От того насколько правильно верифицирована опухоль (определен ее тип, степень злокачественности и другие характеристики) зависит правильность и эффективность лечения. Важную роль в этом играют гистологические исследования.

О том, как проходят гистологические исследования, какие задачи кроме диагностических они позволяют решать, что влияет на сроки их выполнения рассказывает заведующая патологоанатомическим отделением с прозектурой НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, к.м.н. Анна Сергеевна Артемьева.

Что служит материалом для патоморфологических (гистологических) исследований?

Кусочек ткани пациента: кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, головного и спинного мозга и т.п., так называемый биоптат.

Процесс получения фрагмента ткани (биоптата) — биопсия – это несколько разных способов забора материала для гистологического исследования.

Виды биопсии:

• Пункционная биопсия – «тычок», тонкой или толстой иглой. Пункционные биоптаты редко имеют диаметр больше 1-2 мм.
• Ножевая биопсия – открытая или эндоскопическая (малоинвазивная), в том числе лапароторако-медиастиноскопия.

Биопсию внутренних органов делают под УЗИ-навигацией, либо с помощью хирургического вмешательства.

Операционный материал – это все что удалено во время операции, как правило, орган или его часть, или несколько органов и/или их частей с образованием (опухолью) или без него.

Как обрабатывают эти материалы для проведения гистологического исследования?

1 Этап. Фиксация — «консервирование» биоптата в формалине — специальном химическом растворе, который предотвращает гниение, позволяет сохранить структуры ткани.

Фиксация биоптата может занимать от 6 до 24 часов – в зависимости от его вида и размера.

Операционный материал фиксируется дольше, в несколько этапов. Сначала предварительная фиксация, которая занимает примерно 12 часов. Затем вырезка нужных фрагментов и повторная фиксация еще 24 часа.

Соотношение объема материала к объему формалина должно быть 1:20.

Время фиксации сократить нельзя!

2 Этап. Процессинг — процесс обезвоживания, обезжиривания и пропитки материала парафином. Автомат перемещает кусочек материала из раствора в раствор.

В качестве растворов применяются: абсолютированный изопропиловый спирт (6-8 смен), ксилол (2 смены), расплавленный парафин (2 смены).

Программа разнится для «жирного» материала (к которым относятся, например, ткани молочной железы) и «нежирного» – 36 и 24 часа соответственно.

Процесс получения парафиновых блоков.

3 Этап. Изготовление парафинового блока. Кусок материала помещается в форму с расплавленным парафином (уже другим нежели во время процессинга – с более высокой температурой плавления) и охлаждается. Выполняется вручную, сложно ускорить.

Микротомия

4 Этап. Изготовление срезов. Толщина образца — кусочка ткани, залитого в парафин – 1-3 мм. Толщина каждого среза 4-5 мкм (0,004-0,005 мм). Выполняет лаборант с использованием специального инструмента – микротома.

Срезы монтируются на стекла и должны высохнуть.

Несмотря на то, что часть материала теряется при выравнивании в микротоме, при должном профессионализме, из одного образца — материала от одной биопсии, операционного материала от одной опухоли, возможно изготовить около 100 стекол (микропрепаратов).

Для чего делаются срезы?

Срезы делаются для рутинной окраски гематоксилинном и эозином, иммуногистохимического исследования и других видов исследований.

Срезы для всех исследований используются одинаковые, различается окраска, могут отличаться стекла, на которые они монтируются, так для ИГХ и FISH нужны специальные адгезивные стекла или заряженные стекла.

Гистостейнер

Блоки и стекла способны храниться долгие годы и использоваться для проведения дополнительных гистологических исследований, пересмотров, а также в научных целях.

Архив

Архив гистологических материалов собирается в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова с 1927 года и содержит более 10 млн единиц хранения (микропрепараты — стекла, парафиновые блоки, архивные карточки, влажный архив).

Какие виды гистологических исследований наиболее информативны?

• Гистологическое исследование
• Иммуногистохимия (ИГХ)
• Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH), может быть хромофобной (принцип тот же, другой тип метки)

Что позволяют определить разные виды ги

что это такое в онкологии и расшифровка для людей

Самое главное в начале — определить характер заболевания, насколько опухоль поражает орган, степень дифференцировки, есть ли инвазия. Люди далёкие от медицины часто задаются вопросом: «Гистология — что это такое в онкологии, для чего нужна и что показывает?». Вопрос интересный и довольно обширный, но мы постараемся на него ответить как можно понятнее.

Определение

Гистология — раздел науки, которая изучает строение тканей в организме, как у человека, так и у животных в ветеринарии. Гистологическое исследование показывает патологические отклонения в строении ткани. Врач проводит биопсию — это процедура, когда из органа или с другой поверхности берётся небольшой кусочек мягкой ткани, подозрительный на вид и по поведению, а далее отправляется на исследование.

Что выявляет и показывает?

Далее врач смотрит под микроскопом строение и положение клеток в ткани. У каждой ткани в организме должен быть свой порядок и расположение клеток. Помимо этого они должны иметь своё строение, размер и структуру. Если есть какое-то отклонение, то это может указывать на болезнь, воспаление или онкологию.

Помимо гистологии и гистологического исследования, есть так называемая цитология. Многие пациенты путают, эти два понятия и не знают — в чем разница между цитологией и гистологией.

Цитология — это область медицинской науки, которая изучает строение одной клетки, её ядро, функционирование, а также остальные органеллы. Забор ткани происходит одинаковый. Обычно врач смотрит и проверяет структуру ткани.

При диагностике он наблюдает, что структура не правильной формы и есть атипичные клетки (эти те клеточки, которые сильно отличаются по строению от здоровых). Например, у них увеличенное ядро или они имеют неправильную форму.

Теперь надо определить степень злокачественности и являются ли данные клетки раком. Дело в том, что атипичные клетки или те, которые отличаются от здоровых, не всегда могут быть раком. В доброкачественных опухолях есть такие же аномалии тканей.

Вот как раз гистология и показывает строение и тип клетки. Доктор под более сильным микроскопом просматривает строение атипичной клетки и выявляет степень её злокачественности.

Для чего нужна дифференцировка?

Если клетка раковая, нужно выяснить степень дифференцировки — то есть насколько она отличается от здоровых клеток. Обычно выделяют несколько типов:

1. Высокодифференцированный — клетки немного отличаются от здоровых. Такая патология развивается не быстро, а рак не такой агрессивный.
2. Средне дифференцированный — сильнее отличается от здоровых тканей. Средняя скорость роста и агрессии.
3. Низкодифференцированный — очень агрессивная форма онкологии.
4. Недифференцированный — патологические клетки рака, нельзя отличить от здоровых.

Как понятно из определения врач должен знать насколько опасна опухоль и насколько быстро она развивается, чтобы примерно рассчитать стратегию в лечении и знать сколько у пациента есть времени.

Также по степени дифференцировки, можно определить какой именно химиопрепарат будет наиболее эффективен. Зачастую самые агрессивные виды опухолей более чувствительны к сильнодействующим химическим реагентам и облучению.

Показания к применению

В частности её назначают практически всегда, чтобы наиболее точно знать характер рака. Особенно это решающе на первых стадиях, когда нельзя определить — доброкачественная это новообразование или злокачественное. Гистологическое исследование помогает:

• Точно поставить диагноз;
• Контролировать лечение и скрининг после операции, облучения и химии;
• Скорость патологического процесса;
• Степень дифференцировки;
• Наличие злокачественной опухоли.

Биопсия

Это процедура, когда врач берёт кусочек подозрительной ткани для гистологии и цитологии. Для этого могут использовать несколько вариантов. Если новообразование находится в досягаемой области, то могут просто иссечь кусочек скальпелем. В противном случае могут сделать надрез или провести операцию.

Например, в случае новообразования в матке с помощью специального прибора проникают в орган и берут образец эндометрия. По степени атипичности можно наблюдать — рак это или гиперплазию эндометрия. Образец ткани помещают в специальную пробирку в стерильную среду.

Далее в лаборатории срез пропитывают парафином. После чего его можно достаточно долго хранить. Перед рассмотрением материала под микроскопом, нужно произвести микротомию — то есть сделать маленький срез для того чтобы было удобно рассматривать его под микроскопом.

После накрывается стеклом, и оно может так храниться при любых условиях. Гистологическое стекло можно забрать и хранить у себя. Так частенько делают пациенты, чтобы была возможность обращаться в другие клиники.

ПРИМЕЧАНИЕ! Гистологические стёкла можно хранить только в тёмном, сухом месте при температуре не более 25 градусов по Цельсию.

Гистология в гинекологии

Даёт чёткую картину при постановлении диагноза. Если женщина жалуется на обильное кровотечение или боли в области яичником, тогда врач при осмотре может взять забор ткани. После исследования можно сразу понять характер заболевания и присутствие предракового или онкологического заболевания в шейке матки эндометрия.

Процедура диагностики

Зачастую при всех случаях онкологии проводят одни и те же исследования. Мы постараемся объяснить насколько важна гистология.

1. Возможный пациент приходит с жалобами к врачу или это может быть плановый осмотр.
2. Доктор проводит пальпацию, осмотр и опрашивает пациента.
3. Если есть подозрения на рак, то его направляют сдавать анализы — общий и биохимический анализ крови и кал.
4. При наличии отклонений в анализах пациента направляют к врачу-онкологу.
5. Делается рентгенография, УЗИ брюшной полости.
6. Если у пациента присутствует чёткая симптоматика, то начинается диагностика определенного органа.
7. В случае присутствия ярко выраженной опухоли, делают забор.
8. И уже тут проводят биопсию и отправляют кусок ткани на гистологию.
9. После могут провести КТ или МРТ. Это необходимо для выяснения степени инвазии — насколько раковая опухоль поражает здоровые ближайшие клетки и ткани.

Только после проведения тщательной диагностики, врач строит окончательный диагноз и придумывает стратегию для борьбы с недугом.

ПРИМЕЧАНИЕ! Расшифровкой может заниматься только квалифицированный врач с многолетним стажем. Для более точного диагноза стоит показать результаты нескольким врачам.

Остались вопросы?

Пишите их чуть ниже в комментариях, и наши специалисты на них сразу же ответят. Также можете поделиться своей историей, когда вы сталкивались с гистологическим или цитологическим обследованием.

Загрузка…

Типы цитологических тестов, используемых для выявления рака

Диагностика заболеваний путем изучения отдельных клеток и небольших кластеров клеток называется цитология или цитопатология . Это важная часть диагностики некоторых видов рака.

По сравнению с биопсией ткани, цитологический образец обычно:

• Проще получить
• Доставляет меньше дискомфорта пациенту
• Меньше вероятность серьезных осложнений
• Стоит меньше

Недостатком является то, что в некоторых случаях результат биопсии ткани более точен, но во многих случаях цитологическая жидкость может быть такой же точной.

Цитологические тесты могут использоваться для диагностики или скрининга:

• Диагностический тест используется только для людей, у которых есть признаки, симптомы или есть другие причины подозревать, что у них может быть определенное заболевание (например, рак). Диагностический тест определяет наличие болезни и, если да, то точно и точно классифицирует болезнь.
• Скрининговый тест используется для выявления людей, у которых может быть определенное заболевание, еще до того, как у них появятся симптомы.Ожидается, что скрининговый тест найдет почти всех людей, которые могут болеть этим заболеванием, но скрининговый тест не всегда доказывает наличие болезни.

Часто диагностический тест используется, если результат скринингового теста положительный (то есть, если что-то обнаружено в скрининговом тесте). Некоторые цитологические тесты, такие как Пап-тест, в основном используются для скрининга, в то время как другие могут точно идентифицировать рак (см. «Цитология соскоба или кисточки» ниже). Когда результаты цитологического исследования показывают рак, часто перед началом лечения также проводится биопсия.

Аспирация тонкой иглой

Аспирация тонкой иглой (FNA) иногда считается цитологическим тестом, а иногда — биопсией. Это обсуждается в разделе «Типы биопсии, используемые для выявления рака».

Цитологические исследования жидкостей организма

Жидкости, взятые из полостей (пространств) в теле, можно тестировать на наличие раковых клеток. Вот некоторые из жидкостей полости тела, протестированных таким образом:

• Моча
• Мокрота (мокрота)
• Спинномозговая жидкость, также известная как спинномозговая жидкость или CSF (из пространства, окружающего головной и спинной мозг)
• Плевральная жидкость (из пространства вокруг легких)
• Перикардиальная жидкость (из мешочка, окружающего сердце)
• Асцитная жидкость, также называемая асцит или перитонеальная жидкость (из пространства в области живота)

Цитология соскоба или щетки

Другой метод цитологии состоит в том, чтобы осторожно соскоблить или очистить некоторые клетки исследуемого органа или ткани.Самым известным цитологическим тестом, который позволяет брать образцы клеток таким образом, является Пап-тест. Небольшой шпатель и / или щеточка используются для удаления клеток из шейки матки (нижняя часть матки или матки) для мазка Папаниколау. Другие области, которые можно чистить щеткой или царапать, включают пищевод (трубку для глотания), желудок, бронхи (дыхательные трубки, ведущие к легким) и рот.

.

Что такое цитология? (с иллюстрациями)

Цитология

, более известная как клеточная биология , изучает клеточную структуру, состав клеток и взаимодействие клеток с другими клетками и более крупной средой, в которой они существуют. Термин «цитология» может также относиться к cytopathology , который анализирует клеточную структуру для диагностики заболевания. Микроскопические и молекулярные исследования клеток могут быть сосредоточены на многоклеточных или одноклеточных организмах.

Типы клеток человека, все они изучаются цитологами.

Тот факт, что мы, люди, состоим из миллионов крошечных клеток и что другие формы жизни вокруг нас устроены аналогичным образом, теперь едва ли нуждается в объяснении.Однако концепция клетки относительно нова. Научное сообщество не принимало идею существования клеток до конца 18 века.

Микроскопические и молекулярные исследования клеток могут быть сосредоточены на многоклеточных или одноклеточных организмах.

Признание сходства и различия клеток имеет первостепенное значение в цитологии. Микроскопическое исследование может помочь идентифицировать разные типы клеток. Изучение молекул, образующих клетку, иногда называемое молекулярной биологией, помогает в дальнейшем описании и идентификации.Все области биологии зависят от понимания клеточной структуры. Область генетики существует, потому что мы понимаем структуру и компоненты клеток.

При отсутствии лечения некоторые аутоиммунные заболевания могут способствовать ожирению, утомляемости и летаргии.

Другой важный аспект цитологии — изучение взаимодействия клеток. Изучая, как клетки связаны с другими клетками или окружающей средой, цитологи могут предсказать проблемы или изучить экологические опасности для клеток, такие как токсичные или вызывающие рак вещества.У людей и других многоклеточных структур цитология может исследовать наличие слишком большого количества клеток одного типа или недостаток достаточного количества клеток определенного типа. В простом тесте, таком как общий анализ крови, лаборатория может посмотреть на лейкоциты и определить наличие инфекции, или она может исследовать низкий уровень определенных типов красных кровяных телец и диагностировать анемию.

Анализы мочи выполняются для поиска цитопатологий.

Определенные аутоиммунные заболевания можно диагностировать по аномальным клеточным реакциям. Например, тиреоидит Хашимото — это аутоиммунное заболевание, вызванное аномальной реакцией клеток. Вместо того, чтобы белые кровяные тельца распознавали присутствие нормальных клеток щитовидной железы, эти антитела атакуют их, вызывая снижение уровня щитовидной железы.При отсутствии лечения это состояние может привести к умственной отсталости, крайней усталости, ожирению и, в конечном итоге, к смерти. С помощью цитологии можно распознать аномальные реакции этих антител и начать лечение задолго до того, как это состояние создаст необратимые проблемы.

Цитопатология преследует аналогичные цели, но стремится найти клетки, которые не должны присутствовать в организме.Например, общий анализ мочи и крови может выявить наличие паразитов или бактерий, которые могут вызвать болезнь или смерть. Следовательно, в цитологии понимание одноклеточных организмов, таких как многие формы бактерий, так же важно, как и понимание многоклеточных структур.

Это также один из основных диагностических инструментов для выявления рака.Ежегодный гинекологический осмотр женщины почти всегда включает в себя мазок Папаниколау, набор тканей, которые анализируются на клеточную структуру для выявления ранних образований раковых клеток. Раннее обнаружение может повысить выживаемость. Точно так же пункционная биопсия опухоли в груди или в другом месте может обнаружить раковые клетки и стать отличным средством диагностики.

Мазки Папаниколау обычно выполняются во время ежегодного гинекологического осмотра женщины..

Что происходит с образцами биопсии и цитологии?

Стандартные процедуры и методы используются для обработки почти всех типов биоптатов. Эти процедуры представляют собой обычные способы подготовки образца в лаборатории. Другие процедуры, описанные ниже, также могут выполняться на определенных типах образцов (например, на лимфатических узлах и костном мозге).

Как обычно обрабатываются биопсии

После извлечения образец биопсии помещается в контейнер со смесью воды и формальдегида (формалина) или другой жидкости для его сохранения.На контейнере указано имя пациента и другая идентифицирующая информация (например, номер больницы и дата рождения) и место проведения биопсии (где именно на теле она была взята). Затем его отправляют в лабораторию патологии. Затем патологоанатом или обученный лаборант смотрит на образец без микроскопа. Это называется общий экзамен . (В медицине «брутто» означает , видимое без микроскопа .) Это делается для записи того, что можно увидеть, просто глядя на, измеряя или ощущая ткань.Общий анализ включает размер, цвет, консистенцию и другие характеристики образца ткани. Сотрудники лаборатории могут даже сфотографировать образец как часть записи. Общий осмотр важен, поскольку патолог может увидеть признаки, указывающие на рак. Это также помогает патологу решить, какие части большой биопсии наиболее важны для просмотра под микроскопом.

Для небольших биопсий, таких как пункционная биопсия или биопсия стержневой иглой, обычно весь образец исследуется под микроскопом.Салфетки помещаются в небольшие контейнеры, называемые кассетами . Кассеты надежно удерживают ткань во время обработки. После обработки, которая может занять несколько часов (но обычно проводится в течение ночи), образец ткани помещают в форму с горячим парафином. Воск остывает, образуя твердый блок, который защищает ткань.

Этот парафиновый восковой блок с заделанной тканью разрезают на очень тонкие срезы с помощью инструмента, называемого микротомом . Эти тонкие срезы образца помещают на предметные стекла и погружают в несколько пятен или красителей, чтобы изменить цвет ткани.Благодаря цвету клетки легче увидеть под микроскопом. Для большинства образцов биопсии рутинная обработка — это все, что требуется. На этом этапе (обычно на следующий день после проведения биопсии) патолог смотрит на ткань под микроскопом. Такой взгляд на твердые образцы называется гистология , которая представляет собой исследование структур клеток и тканей.

Специальная обработка биопсии: Замороженный участок (во время операции)

Иногда информация об образце ткани необходима во время операции для принятия немедленных решений.Если хирург не может дождаться дня или более, необходимых для рутинной обработки и гистологии, он или она запросит консультацию по патологии во время операции (во время операции). Это часто называется экзаменом замороженного раздела .

Как делается замороженный участок?

Когда выполняется исследование замороженного среза, свежая ткань отправляется из операционной прямо к патологоанатому. Поскольку пациент часто находится под общим наркозом (засыпает лекарствами), важно быстро осмотреть ткань.Обычно это занимает от 10 до 20 минут. Свежая ткань тщательно исследуется патологоанатомом, чтобы решить, какую ее часть следует рассматривать под микроскопом. Вместо того, чтобы обрабатывать ткань восковыми блоками, ткань быстро замораживается в специальном растворе, который образует вокруг ткани нечто похожее на кубик льда. Затем его тонко нарезают (нарезают) на специальной машине, быстро окрашивают (погружают в ряд красителей) и рассматривают под микроскопом. Замороженные срезы обычно не показывают особенности ткани так четко, как срезы ткани, залитые воском, но они достаточно хороши, чтобы помочь хирургу принимать решения во время операции.

Когда готово замороженное сечение?

Чтобы узнать, является ли опухоль раком: Иногда тип необходимой операции зависит от того, является ли опухоль раковой (злокачественной). Например, простого удаления опухоли может быть достаточно для лечения опухоли, которая не является раковой (доброкачественной), но может потребоваться удаление большего количества ткани и / или лимфатических узлов, если опухоль является раковой. В таком случае хирург может отправить опухоль на исследование замороженного среза. Часто это может дать достаточно информации, чтобы помочь хирургу решить, какой тип операции лучше всего подходит для пациента.Иногда, однако, замороженный участок не дает однозначного ответа, и для получения четкого ответа кусочек ткани должен пройти обычную или даже специальную обработку. В этом случае хирург обычно прекращает операцию и закрывает хирургический разрез (разрез). После получения результатов может потребоваться еще одна операция.

Чтобы убедиться, что рак полностью удален: Хирургическое лечение рака часто представляет собой сложный баланс между удалением достаточного количества ткани, чтобы почувствовать, что рак полностью удален, и оставлением достаточного количества нормальной ткани, чтобы ограничить повреждение.Если хирург обеспокоен тем, что рак не был удален полностью, срез края ткани, который был удален (называемый полем ), отправляется на диагностику замороженного среза. Если на границе нет раковых клеток, дополнительная операция обычно не требуется. Но если раковые клетки обнаружены, можно предположить, что некоторые из них еще остались в ткани пациента. Если это произойдет, хирург обычно удаляет больше ткани, чтобы попытаться удалить все раковые клетки и снизить вероятность повторного рака.Если невозможно удалить больше ткани, могут быть другие варианты, такие как облучение, чтобы убить оставшиеся раковые клетки.

Процесс для хирургии Мооса (хирургия под микроскопом)

Эта процедура используется для лечения некоторых видов рака кожи. В хирургии Мооса хирург удаляет тонкий слой кожи, в который могла проникнуть опухоль, а затем проверяет образец под микроскопом. Если видны раковые клетки, удаляются другие слои и проверяются до тех пор, пока в образцах кожи не будут обнаружены раковые клетки.Этот процесс идет медленно, но это означает, что можно сохранить больше нормальной кожи рядом с опухолью. Хирургия Мооса — это узкоспециализированная техника, которую должны использовать только обученные врачи.

Как обрабатываются образцы цитологии

Порядок обработки цитологических образцов зависит от типа образца. Некоторые образцы размазываются на предметных стеклах микроскопа врачом, который получает образец. Эти слайды, которые называются мазками , затем отправляются в цитологическую лабораторию, где они погружаются в серию пятен (цветных красителей), очень похожих на те, которые используются для образцов биопсии.

Другие образцы, такие как биологические жидкости, нельзя легко поместить на предметное стекло микроскопа, потому что они слишком разбавлены (слишком мало клеток в большом объеме жидкости). Процедуры используются для концентрирования этих клеток на предметном стекле до того, как они будут окрашены.

После обработки и окрашивания образцы исследуют под микроскопом. Аномальные клетки обнаруживаются и помечаются специальной ручкой. Затем патологоанатом исследует отмеченные клетки, чтобы поставить диагноз.

Как долго хранятся образцы патологии?

Федеральный закон под названием CLIA (Поправки по улучшению клинических лабораторий) регулирует регулирование и сертификацию клинических лабораторий.Чтобы получить аккредитацию CLIA, лаборатории должны хранить образцы человека в течение минимального времени. Например, CLIA говорит, что лаборатории должны хранить:

• Цитологические препараты минимум 5 лет
• Гистопатологические слайды за не менее 10 лет
• Блоки парафиновые не менее 2 лет

В некоторых штатах действуют собственные законы, согласно которым лаборатории должны хранить образцы патологий дольше, чем время, указанное в правилах CLIA. А в некоторых лабораториях есть правила хранения образцов дольше, чем требуется федеральными законами или законами штата.

Что это значит для вас

Некоторые люди хотят получить второе мнение о диагнозе, сделанном на их образце ткани (образце). Это называется обзором патологии. Это означает, что нужно попросить другого врача взглянуть на вашу биопсийную ткань и поставить диагноз на основании увиденного.

Образцы тканей человека не выбрасываются сразу после тестирования. Таким образом, в большинстве случаев, если ткани достаточно, образец можно отправить другому врачу или в лабораторию.

Иногда хранение образцов в течение более длительного времени может быть полезным и по другим причинам.Например, если у человека, пережившего рак, развивается опухоль через несколько лет после удаления первой, врачи захотят узнать, является ли эта новая опухоль старой, возвращающейся (рецидив), или совершенно новым раком.

Это часто можно определить, основываясь на расположении двух опухолей и сравнивая гистопатологические слайды обоих образцов. Но иногда также могут помочь дополнительные тесты (например, иммуногистохимические окрашивания), которые можно провести с использованием ткани из парафинового блока исходного образца.

.

Что врачи ищут в образцах биопсии и цитологии?

Общие характеристики

Различные ткани и органы под микроскопом выглядят по-разному. Это потому, что они образованы разными типами ячеек и потому что ячейки расположены по-разному. Что еще более важно, такие заболевания, как рак, изменяют обычный внешний вид каждого типа ткани или органа.

Большинство образцов тканей и клеток исследуются патологами, врачами, имеющими специальную подготовку в области диагностики заболеваний с помощью лабораторных тестов.Иногда другие врачи также исследуют образцы или ткани органов, относящихся к их области знаний. Например, гематологи (врачи, специализирующиеся на заболеваниях крови) часто изучают образцы крови и костного мозга своих пациентов, а некоторые дерматологи (врачи, специализирующиеся на кожных заболеваниях) изучают образцы биопсии кожи своих пациентов.

Некоторые особенности, которые врачи ищут под микроскопом, важны только в том случае, если они обнаруживаются в определенных типах тканей, в то время как другие более важны, если они обнаруживаются почти во всех тканях.

Вот несколько общих концепций, объясненных в менее технических терминах, чтобы помочь вам лучше понять, как врачи принимают решение о наличии рака.

Размер и форма ячеек

Общий размер и форма раковых клеток часто ненормальны. Они могут быть меньше или больше нормальных клеток. Нормальные клетки часто имеют определенную форму, которая помогает им выполнять свою работу. Раковые клетки обычно не функционируют должным образом, и их форма часто искажается. В отличие от нормальных клеток, которые, как правило, имеют одинаковый размер и форму, раковые клетки часто различаются по размеру и форме.

Размер и форма ядра клетки

Ядро — это центр клетки, содержащий ДНК клетки. Размер и форма ядра раковой клетки часто ненормальны. Как правило, ядро ​​раковой клетки больше и темнее, чем у нормальной клетки, и его размер может сильно различаться. Еще одна особенность ядра раковой клетки заключается в том, что после окрашивания определенными красителями оно выглядит темнее, если рассматривать его под микроскопом. Ядро раковой клетки больше и темнее, потому что часто содержит слишком много ДНК.

Расположение камер

Расположение нормальных клеток отражает функцию каждой ткани. Например, клетки могут образовывать железы, вырабатывающие вещества, которые поступают в другие части ткани. Ткань железы в груди, из которой вырабатывается молоко во время кормления грудью, состоит из долек, в которых вырабатывается молоко, и протоков, по которым молоко проходит от долек к соску. Клетки желудка также образуют железы, вырабатывающие ферменты и кислоту, которые переваривают пищу, а также слизь, которая помогает защитить слизистую оболочку желудка.

Когда рак развивается в груди, желудке и многих других тканях, раковые клетки не образуют железы, как должны. Иногда раковые клетки образуют аномальные или деформированные железы. Иногда они образуют скопления клеток, которые совсем не похожи на железы.

Раковые клетки прорастают (вторгаются) в другие ткани. Нормальные клетки остаются на своем месте в ткани. Способность раковых клеток вторгаться отражает тот факт, что их рост и движение не координируются с соседними клетками.Благодаря этой способности проникать рак распространяется на близлежащие ткани и повреждает их. И, в отличие от нормальных клеток, раковые клетки могут метастазировать (распространяться по кровеносным или лимфатическим сосудам) в отдаленные части тела. Знание этого помогает врачам распознавать рак под микроскопом, потому что обнаружение клеток, которым они не принадлежат, является полезным признаком того, что они могут быть раком.

Тип рака

Существует несколько основных видов рака, которые врачи могут далее классифицировать на сотни или даже тысячи типов в зависимости от того, как они выглядят под микроскопом.Раковые образования называют в соответствии с типом нормальных клеток и тканей, на которые они больше всего похожи. Например, рак, похожий на железистую ткань, называется аденокарциномой . Другие виды рака, которые напоминают определенные клетки иммунной системы, называются лимфомами , а те, которые выглядят как костная или жировая ткань, — это остеосаркомы , и липосаркомы , соответственно.

Оценка рака

При определении типа клеток или тканей, на которые похож рак, врачи также решают, насколько они похожи на нормальные клетки или ткани.Это степень рака. Раковые образования, которые больше похожи на нормальные ткани, называются низкой степени , а те, которые не очень похожи на нормальные ткани, имеют высокую степень степень . Рак высокой степени злокачественности имеет тенденцию расти и распространяться быстрее, чем рак низкой степени злокачественности. Пациенты с раком высокой степени злокачественности имеют более неблагоприятный прогноз (прогноз).

.